組合RhoA/Rac1/cdc42 活化檢測試劑盒

       小G蛋白家族中最重要的是Rho家族蛋白中的Rac1、RhoA和Cdc42, 這三種蛋白相互協調、相互依賴,共同調節骨架蛋白的結構重組和形成, RhoA/Rac1/Cdc42的作用相反,Rac1/Cdc42對神經元的發生、遷移、生長、維持等起到促進作用,而RhoA對神經元的形成和維持起到抑制作用。體內Rho有兩種形式,即GDP結合的無活性狀態與GTP結合的活性狀態。并且,通過體內三類蛋白,即鳥苷酸轉換因子(guaninenucleotide exchange factor,GEF)、GTPase激活因子(GTPase activating protein,GAP)與鳥甘酸解離抑制子(guanine nucleotide dissociation inhibitor,GDI),有序地調控Rho蛋白活性狀態的轉換。它還參與許多生理活動，包括細胞遷移、粘附、胞質分裂、增殖、分化和凋亡，并在更大程度上參與細胞轉化,在肌動蛋白細胞中, Cdc42,Rho,Rac在信號傳導的過程中起著重要的作用。學習他們之間的串擾和互相之間的反饋對研究他們之間的相互反應可以提出很多不錯的建議。同時，對Rho蛋白家族的時空動力學的觀測可以為空間極性和Cdc42/Rac和Rho提供證據.

組合RhoA/Rac1/cdc42 活化檢測試劑盒的用途：
 

 研究 Rac1 ,RhoA,和 Cdc42 信號通路之間的細胞型特異性串擾。
 研究 Rho 家族小G蛋白激活 對其他信號通路的影響。
 體內 Rac1/RhoA/Cdc42 激活水平的分析。
 檢測增強 Rac1/RhoA/Cdc42 活性的化合物和蛋白質。
 檢測抑制 Rac1/RhoA/Cdc42 活性的化合物和蛋白質。
 對細胞(組織) 中的Rac1/RhoA/Cdc42  的活性進行定位,定量,定性分析 

組合RhoA/Rac1/cdc42 活化檢測試劑盒的原理：

Rac1激活檢測原理：利用特異性識別Rac1-GTP空間構象的單克隆抗體，能夠與細胞或者組織中的蛋白的GTP 空間構象結合，然后然后利用Protein A/G將抗原抗體的結合物吸附下來，再利用特異性識別 Rac1的兔多克隆抗體進行免疫印跡分析進行檢測。
RhoA激活檢測原理：利用特異性識別RhoA-GTP空間構象的單克隆抗體，能夠與細胞或者組織中的蛋白的GTP 空間構象結合，然后然后利用Protein A/G將抗原抗體的結合物吸附下來，再利用特異性識別 RhoA的兔多克隆抗體進行免疫印跡分析進行檢測。
Cdc42激活檢測原理：利用特異性識別cdc42-GTP空間構象的單克隆抗體，能夠與細胞或者組織中的蛋白的GTP 空間構象結合，然后然后利用Protein A/G將抗原抗體的結合物吸附下來，再利用特異性識別 cfc42的兔多克隆抗體進行免疫印跡分析進行檢測。

Rac1 激活示例圖片：

RhoA激活示例圖片：

 Cdc42 激活示例圖片：

                       與傳統的 GST- pull down 方法相比，該試劑盒具有以下明顯優勢

1.靈敏度高；誘導蛋白與目標蛋白中的結合對蛋白量的要求比較高。而抗體與蛋白的結合對樣本中蛋白的要求比較少。

2. 特異性強；因為誘餌蛋白是需要加上GST標簽的重組蛋白，所以是非生理狀態下的驗證，蛋白質的結構和形式可能與天然狀態下存在一定差異，而抗體與目標蛋白的結合 ，活細胞狀態下蛋白質之間的相互作用被保持，所以其反映的是細胞中真實的蛋白情況.

3. 應用更為廣泛；試劑盒中能夠特異性識別GTP結合狀態的三聚體G蛋白或者小G蛋白的單克隆抗體，適應各種種屬（Human，Mouse，Rat，Rice plants，Pig Cotton，bacteria，Escherichia coli等）應用范圍非常廣泛（ IP ,WB ,IHC IF ICF,ICC,IHF.FC,Elisa 等）隨著這些應用的普及，G 蛋白信號轉導的研究進展，必將進一步加快。